喹諾酮類藥物殘留分析技術(shù)測(cè)定方法（四）

[db:作者] / 2022-12-19 00:00

(6)自組裝環(huán)熒光顯微成像技術(shù)(self-ordered ring fluorescence microscopic imaging technique)自組裝環(huán)(selforderedring，SOR)熒光顯微成像技術(shù)是通過分析物在環(huán)線上沉積后，運(yùn)用倒置熒光顯微鏡，以電荷耦合元件攝像系統(tǒng)作為顯微鏡圖像獲取技術(shù)采集圖像，將圖像信號(hào)轉(zhuǎn)換成電信號(hào)輸入計(jì)算機(jī)進(jìn)行數(shù)據(jù)讀取及圖像處理，然后應(yīng)用軟件對(duì)獲得圖像讀取相關(guān)參數(shù)進(jìn)行分析。它具有背景干擾小、耗樣量少、簡單、快速及對(duì)環(huán)境無污染等優(yōu)點(diǎn)。鄧鳳玉等采用自組裝環(huán)熒光顯微成像技術(shù)測(cè)定生物樣品中的托氟沙星(TOS)，在pH 10.50的氨-氯化銨緩沖溶液和聚乙烯醇-124(PVA-124)介質(zhì)中，以Mn2+和十六烷基三甲基溴化胺(CTMAB)為敏化劑，TOS在疏水性玻片表面形成自組裝環(huán)，建立了檢測(cè)TOS的快速方法。當(dāng)點(diǎn)樣體積為0.20μL時(shí)，線性范圍為4.05×10-14～4.28×10-13 mol/ring，LOD為4.10×10-15 mol/ring；兔子灌喂TOS藥片后血清中TOS濃度的加標(biāo)回收率為90.0%～105.0%，RSD為1.9%～3.3%；羊組織樣品中TOS加標(biāo)回收率在92.0%～101.0%，RSD小于2.7%。Dong等在疏水性載玻片上，利用SOR熒光顯微成像技術(shù)，以Zn2+和CTMAB作為增敏劑，PVA-124及氨-氯化銨緩沖溶液(pH10.00)為介質(zhì)，建立了雞血清、雞肉、雞脂中司帕沙星(SPA)殘留量測(cè)定方法。滴定體積為0.20μL，測(cè)定范圍在1.38×10-13～2.03×10-12 mol/ring之間(或6.90×10-8mol/L)；以甲醇或乙腈為提取劑，SPA在所有添加水平的回收率均在90.74%～106.61%內(nèi)，RSD小于3.0%。

(7)生物傳感器法(biosensor)

1)分子印跡傳感器(molecularly imprinted sensor)

當(dāng)模板分子(印跡分子)與聚合物單體接觸時(shí)會(huì)形成多重作用點(diǎn)，通過聚合過程這種作用就會(huì)被記憶下來，當(dāng)模板分子除去后，聚合物中就形成了與模板分子空間構(gòu)型相匹配的具有多重作用點(diǎn)的空穴，這樣的空穴將對(duì)模板分子及其類似物具有選擇識(shí)別特性。Xuan-Anh等建立了基于分子印跡聚合物(MIP)的非競爭性熒光偏振(FP)方法來檢測(cè)牛奶中的ENR。FP是一種熒光標(biāo)記檢測(cè)技術(shù)，它把熒光物質(zhì)標(biāo)記在特定物質(zhì)分子，使原本微弱的反應(yīng)信號(hào)轉(zhuǎn)化成較強(qiáng)的熒光信號(hào)，同時(shí)在光路的合適位置分別加上起偏器和檢偏器就可測(cè)出待測(cè)物的偏振熒光強(qiáng)度，大大提高了方法的靈敏度和特異性。FP法不需分離游離和結(jié)合的示蹤物，而且所有測(cè)定在溶液中進(jìn)行，可以達(dá)到真正的平衡，因而具有所需的樣品量少、靈敏度高、重復(fù)性好、操作簡便等多種優(yōu)勢(shì)。QNs本身具有較強(qiáng)的熒光可建立非競爭的直接FP方法，方法對(duì)ENR的LOD為36ng/L遠(yuǎn)低于其在牛奶中的MRL，而且對(duì)DAN也有明顯的交叉反應(yīng)。有機(jī)溶劑是常用且非常有效的樣品提取及蛋白沉淀試劑，然而抗體通常難以耐受較高濃度的有機(jī)溶劑。MIP是一種化學(xué)合成的識(shí)別分子，對(duì)有機(jī)溶劑有著很高的耐受力，該方法用兩倍于牛奶樣品體積的乙腈提取藥物，再用緩沖液1倍稀釋便可基本消除基質(zhì)干擾，直接進(jìn)行熒光偏振檢測(cè)，這說明其至少可耐受30%的乙腈。

2)表面等離子共振傳感器(surface plasmon resonance sensor)

表面等離子共振(SPR)技術(shù)具有靈敏度高、操作簡單、能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測(cè)反應(yīng)的動(dòng)態(tài)過程，只需對(duì)樣品進(jìn)行簡單的預(yù)處理，無需進(jìn)行標(biāo)記，也可以無需純化各種生物組分，耗樣量少，檢測(cè)時(shí)間短，已被廣泛應(yīng)用于各個(gè)研究領(lǐng)域。Marchesini等建立了基于SPR的雙通道檢測(cè)方法來篩選雞肉中的QNs殘留。其中1號(hào)通道加入廣譜性多抗可同時(shí)檢測(cè)NOR、CIP、ENR、SAR和DIF五種化合物，其半數(shù)抑制濃度(IC50)在2～10ng/L，平均回收率74%；2號(hào)通道選擇特異性多抗檢測(cè)FLU的IC50為2.7ng/L，平均回收率88%。同時(shí)將此方法與高解析LC-QTOF/MS串聯(lián)，可在篩選后及時(shí)進(jìn)行質(zhì)譜確證。Huet等建立了魚肉、雞肉和雞蛋中13種QNs(NOR、SAR、DIF、CIP、PEF、OFL、FLU、OXO、DAN、ENR、MAR、LOM和ENO)的SPR殘留檢測(cè)方法。以NOR為標(biāo)準(zhǔn)參照，在雞肉、雞蛋和魚肉中的CCa分別為0.13μg/kg、0.29μg/kg和0.30μg/kg，IC50分別為1μg/kg、1.5μg/kg和3.1μg/kg，在雞蛋和雞肉基質(zhì)中的檢測(cè)范圍為0.1～10μg/kg，在魚肉基質(zhì)中的檢測(cè)范圍為0.1～100ug/kg。Mellgren等研制了檢測(cè)牛奶中ENR及其代謝物CIP的SPR免疫傳感器，其探頭表面覆蓋著可更換的固定有ENR的傳感膜，當(dāng)固定ENR與制備的抗體發(fā)生結(jié)合反應(yīng)時(shí)，引起探頭表面折射系數(shù)變化，同時(shí)折射角發(fā)生位移，借此對(duì)樣品中待測(cè)物進(jìn)行測(cè)定。ENR和CIP的LOD為1.5ug/kg，回收率分別為90%和86%，RSD分別為8.3%和7.5%。

上一篇：喹諾酮類藥物殘留分析技術(shù)測(cè)定方法（三）

下一篇：喹諾酮類藥物殘留分析技術(shù)測(cè)定方法（五）

食品安全檢測(cè)服務(wù)聯(lián)系電話：13613841283

標(biāo)簽:

食品安全網(wǎng) ：https://www.food12331.com

上一篇：喹諾酮類藥物殘留分析技術(shù)測(cè)定方法（五）

下一篇：返回列表