阿維菌素類藥物殘留測(cè)定方法（四）

[db:作者] / 2022-12-26 00:00

(5)免疫分析法(immunoassay，IA)

IA與儀器方法不同，它具有高度的選擇性和靈敏度，可使分析過(guò)程簡(jiǎn)化，適合復(fù)雜基質(zhì)中痕量組分的分析，它的基本原理是利用抗原-抗體的特異性反應(yīng)，AVMs分析中主要有酶聯(lián)免疫分析法(ELISA)、免疫傳感器法(immunosensor)等。

Schmidt等制備了抗IVM的單克隆抗體，可以同時(shí)識(shí)別IVM和AVM，標(biāo)準(zhǔn)曲線的50%抑制率時(shí)的待測(cè)物濃度IC50分別為3μg/kg和7ug/kg，然而該抗體并沒(méi)有作進(jìn)一步的研究。Crooks等用結(jié)構(gòu)改造后的IVM免疫兔子，制備了抗IVM的多克隆抗體，并以此建立了競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法，用于牛肝樣品中IVM的檢測(cè)。該方法LOD為1.6ng/g，批內(nèi)和批間RSD分別為8.8%和14.6%。該ELISA方法與HPLC分析結(jié)果高度符合(r=0.99)。楊君宏等建立了一種間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法，檢測(cè)牛組織中的AVMs殘留。該方法可同時(shí)檢測(cè)牛肝臟和肌肉中的AVM、IVM和EPR殘留。該方法IC50為4.8ng/mL，線性范圍為1.1～21.9ng/mL；以20ng/mL、50ng/mL和100ng/g濃度添加時(shí)，回收率為53.8%～80.4%，CV為3.4%～17.9%；以5ng/mL、10ng/mL和20ng/g濃度添加時(shí)，回收率為70.9%～108.6%，CV為3.7%～17.1%。

Samsonova等利用IVM的單克隆抗體研制了基于表面等離子體共振(SPR)的光學(xué)生物傳感器，并用于牛奶中IVM的檢測(cè)。樣品用乙腈提取后，經(jīng)C8柱凈化后，用該免疫傳感器檢測(cè)。該方法LOD為16.2ng/mL；在100和50ng/mL添加濃度的回收率分別為102.6%和103%。McGarrity等研發(fā)了一種基于競(jìng)爭(zhēng)性化學(xué)發(fā)光免疫分析的生物芯片，并用于EPR、AVM、IVM和DOR等的篩查。該芯片固體支持物和容器是包含離散測(cè)試位點(diǎn)的生物芯片陣列，點(diǎn)樣后可用半自動(dòng)的臺(tái)式分析儀檢測(cè)。牛奶中該方法的LOD為0.3～2ppb，組織為0.15～6.5ppb；回收率在71%～135%之間。

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