四環(huán)素類藥物殘留分析技術(shù)——測(cè)定傳感器技術(shù)

[db:作者] / 2022-12-19 00:00

(8)傳感器技術(shù)(sensor)

傳感器是利用物理效應(yīng)、化學(xué)效應(yīng)、生物效應(yīng)，把被測(cè)的物理量、化學(xué)量、生物量等轉(zhuǎn)換成符合需要的電量，并按照一定的規(guī)律轉(zhuǎn)換成可用輸出信號(hào)的器件或裝置。目前已在TCs殘留檢測(cè)開始應(yīng)用。

Pellgrini等建立了電化學(xué)傳感器方法檢測(cè)牛奶中TC、OTC、CTC的殘留。方法通過測(cè)定抗菌藥物抑制大腸桿菌ATCC 11303生長的二氧化碳生成率變化進(jìn)行定量，以348ppm、1253ppm、1745ppm、2881ppm、6600ppm的標(biāo)準(zhǔn)二氧化碳濃度制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，取0.5mL的牛奶樣品進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，電化學(xué)傳感器檢測(cè)二氧化碳的濃度。該方法分析時(shí)間約120min，所需樣品量約0.5mL，不需要前處理，CV為0.8%～2.4%，LOD為25μg/L。

Shen等開發(fā)了用葡聚糖凝膠G-50微球作為固相支持物的流動(dòng)熒光傳感器用于測(cè)定水樣中的TC。封裝在CTAB膠束結(jié)構(gòu)中的TC熒光衍生物被保留在裝入熒光流動(dòng)池的微球表面，測(cè)量TC衍生物的天然熒光。DI水通過破壞膠束結(jié)構(gòu)，使TC衍生物從微球表面剝離。以DI水為載體，為固相支持物的再生提供了方便。在優(yōu)化條件下，該方法線性范圍為3～500ug/L，LOD為1.0ug/L。

Moreira等報(bào)道了采用新的電位膜傳感器測(cè)定TC的方法。以2-乙烯基吡啶為功能單體，AmION(I)作為增塑PVC膜的中性離子載體，合成MIP膜傳感器。并對(duì)親脂性鹽和各種國外常見離子的影響進(jìn)行測(cè)試。該傳感器對(duì)TC離子具有顯著的高靈敏度、穩(wěn)定性和選擇性，被成功應(yīng)用于生物流體樣品中TC+離子的測(cè)定。Chao等100以TC為模版合成MIP作為碲化鎘(CdTe)量子點(diǎn)(QD)的熒光猝滅劑，并開發(fā)了檢測(cè)TC的傳感器。采用MAA和烯丙基硫醇連接體的鏈增長聚合合成了MAA-MIP-QD復(fù)合物。對(duì)MIP-QD復(fù)合物進(jìn)行紅外光譜和掃描電鏡表征，并通過熒光猝滅的佩蘭和斯特恩沃爾默模型進(jìn)行評(píng)價(jià)。該傳感器應(yīng)用于牛血清檢測(cè)，平均回收率為96%(牛血清白蛋白)和91%(胎牛血清)，RSD為3.6%和4.8%。

(9)表面等離子共振技術(shù)(surface plasmon resonance，SPR)

SPR傳感技術(shù)是一項(xiàng)新興的生物化學(xué)檢測(cè)技術(shù)，可以無標(biāo)記實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)表面生物分子之間的反應(yīng)，并能對(duì)反應(yīng)進(jìn)行快速簡(jiǎn)便而比較精確的動(dòng)力學(xué)分析，所以相對(duì)于ELISA等傳統(tǒng)技術(shù)，具有無須標(biāo)記、高速、高靈敏度等特點(diǎn)，目前在化學(xué)、生物檢測(cè)、食品安全等研究中應(yīng)用日益廣泛。

Moeller等采用SPR技術(shù)間接法檢測(cè)牛奶和蜂蜜中的TC殘留。方法的原理是根據(jù)TC對(duì)革蘭氏陽性菌的抗菌機(jī)制，TC可以從操縱子(Tet Operator，TetO)中釋放46.6kDa的阻遏蛋白(Tet repressor protein，TetR)，TetR是將一個(gè)生物短雙鏈DNA序列綁定到一個(gè)鏈霉親和素生物傳感器芯片上，如果樣品中存在TC將與TetR偶聯(lián)，誘導(dǎo)TetO和TetR的構(gòu)象變化和親和常數(shù)減少，根據(jù)親和常數(shù)的變化定量檢測(cè)樣品中的TC殘留。該方法檢測(cè)牛奶中TC的LOD為15μg/L，蜂蜜中TC的LOD為25μg/kg。

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